Molecular characterization of ureaplasmas isolated from reproductive tract of goats and sheep from Brazil

Abstract Ovine/caprine ureaplasmas have not yet been assigned a species designation, but they have been classified into nine serotypes. Herein ureaplasmas were searched for in 120 samples of vulvo vaginal mucous from sheep and 98 samples from goats at 17 farms. In addition, semen samples were collected from 11 sheep and 23 goats. The recovered ureaplasma were from sheep and goats from animals without any reproductive disorder symptoms, but not all animals presented positive cultures. In sheep, 17 (68%) cultures of vulvovaginal mucous were positive for ureaplasma and 11 (27%) samples of semen presented positive cultures in animals with clinical signs of orchitis, balanoposthitis or low sperm motility. In goats four ureaplasma isolates were obtained from vulvovaginal mucus, but the semen samples were all negative. The isolates were submitted to Pulsed-field gel electrophoresis methodology and their 16S rRNA genes were sequenced. Fifty percent of ureaplasma recovered from sheep allowed for PFGE typing. Eleven isolates showed eight profiles genetically close to the bovine ureaplasmas. The 16S rRNA gene sequencing showed differences or similarities of isolates from sheep and goats, and the reference strains of bovine and human ureaplasma. Four clinical isolates from sheep were grouped separately. The studied ureaplasma isolates showed to be a diverse group of mollicutes.

Isolamento e PCR para detecção de Mollicutes em muco vaginal e sua associação com problemas reprodutivos em ovinos criados na região de Piedade, São Paulo, Brasil / Mollicutes isolation and PCR on ovine vaginal mucous and its association with reproductive problems in Piedade, SP, Brazil

Pesquisou-se Mycoplasma spp, Ureaplasma spp e Acholeplasma laidlawiii em amostras de muco vaginal de 60 ovinos, criados na região de Piedade no Estado de São Paulo, Brasil, que apresentavam ou não vulvovaginite no exame específico do sistema genital. A caracterização desses microrganismos baseou-se no cultivo e detecção do respectivo DNA pela Reação da Polimerase em Cadeia (PCR) com os primers para classe Mollicutes (GPO e MGSO), para o gênero Ureaplasma (UGPF e UGPS) e a espécie Acholeplasma laidlawii (UNI e ACH3). A presença de micoplasmas não foi associada com distúrbios do trato reprodutivo dos animais, entretanto todos os isolados obtidos de Ureaplasma spp foram provenientes de animais com distúrbios reprodutivos, sugerindo o possível envolvimento desse agente nas enfermidades da reprodução. A PCR para a espécie Acholeplasma laidlawii detectou somente uma amostra positiva.

It was evaluated the presence of Mycoplasma spp, Ureaplasma spp and Acholeplasma laidlawiii in 60 samples of ovine vaginal mucous with the presence or absence of vulvovaginitis in the specific exam of the reproductive tract. The microorganisms were characterized based on bacteriological culture and DNA detection by Polymerase Chain Reaction (PCR) with specific primers to Mollicutes (GPO and MGSO), Ureaplasma (UGPF and UGPS) and Acholeplasma laidlawii (UNI and ACH3). The presence of mycoplasmas could not be associated with reproductive disorders in animals. The PCR to Acholeplasma laidlawii detected only one positive sample. However, all isolations of Ureaplasma spp were from animals presenting reproductive disorders, suggesting a possible involvement of this agent in reproductive diseases.

Mastite bovina por Mycoplasma bovis em rebanhos leiteiros / Mastitis caused by Mycoplasma bovis in dairy cattle

Foram examinadas 713 vacas de três rebanhos leiteiros localizados na regiäo norte do Estado do Paraná e sudoeste do Estado de Säo Paulo, das quais 137 apresentaram mastite. Nas três propriedades foram detectados oito animais (1,12 por cento) com mastite clínica por Mycoplasma bovis. Destes animais, quatro tratados com oxitetraciclina e tilosina e três com enrofloxacina, näo responderam ao tratamento e foram descartados no decorrer da lactaçäo. Uma vaca medicada com enrofloxacina recuperou quase que totalmente a secreçäo láctea mas a eliminaçäo de M. bovis persistiu por toda lactaçäo. Esta vaca apresentou cura bacteriológica na lactaçäo seguinte. O descarte dos animais positivos, monitoramento bacteriológico e a aplicaçäo correta das medidas de prevençäo para as mastites contagiosas controlaram a disseminaçäo de M. bovis nos rebanhos

Etiologia das infecções intramamárias em vacas primíparas no período pós-parto / Etiology of intramammary infections in primiparous cows at postparturition

Foram analisadas 664 amostras de leite de 83 vacas primíparas da raça Holandesa. As amostras foram colhidas no primeiro e no sétimo dia após o parto. Das 664 amostras analisadas, 488 (73,50%) foram bacteriologicamente negativas e 176 (26,50%), positivas para microrganismos aeróbios. Foi observado um alto índice de mastite clínica (20,48%). Os agentes isolados com maior freqüência foram os Staphylococcus spp coagulase negativo (64,20%), Staphylococcus spp coagulase positivo (8,52%), Streptococcus spp (7,96%), Actinomyces pyogenes (4,55%), Mycoplasma bovigenitalium (3,40%) e Escherichia coli (2,84%). Foi observado um maior índice de isolamento de patógenos no primeiro dia (17,62%) em relação ao sétimo (8,88%)

Etiologia das infecções intramamárias em vacas primíparas no período pós-parto

A total of 664 foremilk samples from 83 Holstein cows were cultured. Quarter samples were collected at parturition and 7 days post the first parturition. From 664 milk samples examined, 488 (73.50%) were bacteriologically negative and 176 (26.50%) were positive. A high incidence (20.48%) of clinical mastitis was observed. The most frequently encountered isolates were coagulase negative staphylococci (64.20%), coagulase positive staphylococci (8.52%), streptococci (7.96%), Actinomyces pyogenes (4.55%), Mycoplasma bovigenitalium (3.40%) and Escherichia coli (2.84%). The frequency of mastitis pathogen isolation was highest at parturition (17.62%) and decreased markedly during the first week (8.88%).

Foram analisadas 664 amostras de leite de 83 vacas primíparas da raça Holandesa. As amostras foram colhidas no primeiro e no sétimo dia após o parto. Das 664 amostras analisadas, 488 (73,50%) foram bacteriologicamente negativas e 176 (26,50%), positivas para microrganismos aeróbios. Foi observado um alto índice de mastite clínica (20,48%). Os agentes isolados com maior freqüência foram os Staphylococcus spp coagulase negativo (64,20%), Staphylococcus spp coagulase positivo (8,52%), Streptococcus spp (7,96%), Actinomyces pyogenes (4,55%), Mycoplasma bovigenitalium (3,40%) e Escherichia coli (2,84%). Foi observado um maior índice de isolamento de patógenos no primeiro dia (17,62%) em relação ao sétimo (8,88%).